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Products產(chǎn)品中心

包涵體蛋白表達(dá)

簡(jiǎn)要描述:包涵體蛋白表達(dá)是一種在基因工程中常見(jiàn)的現(xiàn)象,主要發(fā)生在外源基因在原核細(xì)胞,尤其是大腸桿菌中高效表達(dá)時(shí)。在這種情況下,重組蛋白形成的是由膜包裹的高密度(1.3 mg/ml)不溶性蛋白質(zhì)顆粒,這些顆粒在顯微鏡下觀(guān)察時(shí)為高折射區(qū),與胞質(zhì)中其他成分有明顯區(qū)別。

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
  • 更新時(shí)間:2025-07-23
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:595

詳細(xì)介紹

貨號(hào)PLDK001規(guī)格1ml
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

包涵體蛋白表達(dá)是一種在基因工程中常見(jiàn)的現(xiàn)象,主要發(fā)生在外源基因在原核細(xì)胞,尤其是大腸桿菌中高效表達(dá)時(shí)。在這種情況下,重組蛋白形成的是由膜包裹的高密度(1.3 mg/ml)不溶性蛋白質(zhì)顆粒,這些顆粒在顯微鏡下觀(guān)察時(shí)為高折射區(qū),與胞質(zhì)中其他成分有明顯區(qū)別。

包涵體的形成可能與多種因素有關(guān),包括蛋白表達(dá)量過(guò)高、氨基酸組成、所處的環(huán)境以及蛋白的來(lái)源等。例如,當(dāng)?shù)鞍缀铣伤俣冗^(guò)快時(shí),可能導(dǎo)致蛋白沒(méi)有足夠的時(shí)間進(jìn)行正確的折疊,二硫鍵不能正確配對(duì),進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)無(wú)法達(dá)到足夠的溶解度,最終形成包涵體。

由于包涵體中的蛋白是非折疊狀態(tài)的聚集體,因此不具有生物學(xué)活性。為了獲得具有生物學(xué)活性的蛋白質(zhì),包涵體的純化和復(fù)性過(guò)程至關(guān)重要。包涵體的純化主要包括樣本破碎、洗滌、溶解、復(fù)性、純化以及鑒定幾個(gè)步驟。其中,復(fù)性是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程,常用的復(fù)性方法包括稀釋復(fù)性、透析復(fù)性、凝膠過(guò)濾層析和離子交換層析等。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

您是否厭倦了花費(fèi)數(shù)天時(shí)間進(jìn)行轉(zhuǎn)化以及精細(xì)的細(xì)胞培養(yǎng)以獲得您感興趣的蛋白質(zhì)?在這個(gè)時(shí)間就是金錢(qián)的快節(jié)奏世界中,您是否正在尋找具有成本效益的蛋白質(zhì)生產(chǎn)平臺(tái)? 與傳統(tǒng)的基于細(xì)胞的方法相比,無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)是加速您的研究開(kāi)發(fā)的優(yōu)質(zhì)解決方案,使您節(jié)約控制成本并靈活調(diào)控反應(yīng)參數(shù),以更快、更有效方式的獲得目的蛋白產(chǎn)物。

“無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)技術(shù)提供的純化蛋白質(zhì),在數(shù)量和速度上都超過(guò)常規(guī)方法。表達(dá)的每一種蛋白質(zhì)都可以是一種治療候選物,并且可以使我們比以往快2個(gè)月生成數(shù)據(jù)包,同時(shí)節(jié)省資金。通過(guò)繼續(xù)使用無(wú)細(xì)胞蛋白技術(shù),我們預(yù)期將可以在未來(lái)18個(gè)月內(nèi),節(jié)省一名全職員工約6個(gè)月的時(shí)間。” ——國(guó)外客戶(hù)對(duì)無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)技術(shù)的評(píng)價(jià)。

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒依賴(lài)T7轉(zhuǎn)錄和大腸桿菌內(nèi)源性翻譯機(jī)制。反應(yīng)體系包含轉(zhuǎn)錄、翻譯、蛋白質(zhì)折疊和能量再生所需的所有生物成分,例如核糖體、tRNA、分子伴侶、代謝酶、翻譯起始和延伸因子,試劑盒能夠以PCR產(chǎn)物、環(huán)狀質(zhì)粒為模板,您只需將模板添加到其中即可實(shí)現(xiàn)目的蛋白質(zhì)的快速、高效表達(dá)。

產(chǎn)品特色

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

快速:最快1小時(shí)即可檢測(cè)到目的蛋白,10小時(shí)蛋白合成達(dá)到峰值;

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

模板靈活:支持質(zhì)粒模板以及PCR模板*;

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

表達(dá)量高:最高可實(shí)現(xiàn)3mg/mL以上產(chǎn)率的蛋白制備;

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

適用蛋白種類(lèi)多:可表達(dá)各種類(lèi)型的蛋白,包括富含二硫鍵的蛋白、膜蛋白等。

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

操作簡(jiǎn)單:一步反應(yīng),僅需將反應(yīng)組分與DNA模板混合即可制備蛋白;

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

高通量:可在96孔板中進(jìn)行表達(dá)篩選,當(dāng)檢測(cè)到陽(yáng)性表達(dá)后,可進(jìn)行體系放大;

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

蛋白共表達(dá):可在同一反應(yīng)中,同時(shí)表達(dá)多種蛋白;

 

產(chǎn)品組成

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒提供一種制備重組蛋白的方法,可輕松進(jìn)行檢測(cè)和純化。該試劑盒提供的表達(dá)系統(tǒng)主要包含:

1、優(yōu)化的大腸桿菌提取物,增加了DNA轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程中結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,增加可溶性蛋白的產(chǎn)量;

2、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,通過(guò)ATP再生系統(tǒng)持續(xù)為蛋白質(zhì)合成提供能量;

3、優(yōu)化濃度比例的氨基酸,為蛋白質(zhì)合成提供充足的底物供應(yīng);

4、含GFP基因的優(yōu)化表達(dá)載體,GFP作為陽(yáng)性對(duì)照可以直觀(guān)觀(guān)測(cè)蛋白表達(dá)結(jié)果。

產(chǎn)品應(yīng)用

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒可用于但不限于以下場(chǎng)景:

① 抗體發(fā)現(xiàn)與驗(yàn)證

② 高通量篩選

案例數(shù)據(jù)

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

產(chǎn)品售價(jià)

名稱(chēng)

貨號(hào)

規(guī)格*

目錄價(jià)

適用場(chǎng)景

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

PLDK001

1ml

¥2120

大多數(shù)蛋白包括抗體、酶

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版)

PLDK001

10ml

¥15900

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(增強(qiáng)版)

PLDK002

1ml

¥3050

絕大多數(shù)蛋白,包括膜蛋白、全長(zhǎng)抗體

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(增強(qiáng)版)

PLDK002

10ml

¥25200

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(全長(zhǎng)抗體版)

AB01

1ml

¥2440

全長(zhǎng)IgG抗體、Fab抗體、抗體高通量篩選

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(全長(zhǎng)抗體版)

AB01

10ml

¥20160

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(高通量版)

HTE01-050

50ml

¥16667

高通量篩選

PLD無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(高通量版)

HTE01-050

1000ml

¥100000

其他規(guī)格 (20ml 、50ml、100ml、1000ml....)

詢(xún)價(jià)

 

 

產(chǎn)品性能

試劑型號(hào)

線(xiàn)性模板支持

二硫鍵支持

產(chǎn)量

體系耐受性

通用性

PLDK001

★★★★

★★★

★★★★

PLDK002

★★★★★

★★★★★

★★★★★

PLD-AB01

★★★★

★★★

★★★

HTE01

★★★

★★★

★★★

產(chǎn)品清單

試劑 包裝 運(yùn)輸 儲(chǔ)存
體積 1 mL 10 mL 50 mL 干冰運(yùn)輸 -80℃
組分A 20 rxns* 200  rxns 1000 rxns
組分B 20 rxns 200  rxns 1000 rxns
陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒(PC) 4 μg 10 μg 20 μg

*無(wú)細(xì)胞終反應(yīng)體積按照50 μL/rxn計(jì)算。

反應(yīng)體系參考

反應(yīng)體系可根據(jù)實(shí)際需要按比例放大或縮小

 

試劑 用量
組分A 20.5 μL
組分B 16.7 μL
DNA模板 終濃度20 ng/μL
ddH20 補(bǔ)至50 μL
總反應(yīng)體積 50μL

 

 

推薦反應(yīng)體積及對(duì)應(yīng)反應(yīng)容器

   
反應(yīng)體積 反應(yīng)容器
50 μL 96孔板
100 μL 48孔板
200-300 μL 24孔板
500-1000 μL
 
6孔板

 

 

 

 

 

 

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